微生物负荷测试

检测项目

总微生物计数类别：

总需氧菌计数：菌落形成单位（CFU/g），参照USP<61>

霉菌酵母计数：菌落形成单位（CFU/g），参照EP2.6.12

厌氧菌计数：菌落形成单位（CFU/g），参照ISO11737

特定病原体检测类别：

大肠杆菌检测：阴性或阳性判定（参照FDABAM）

沙门氏菌检测：阴性或阳性判定（参照ISO6579）

金黄色葡萄球菌检测：菌落计数（CFU/g），参照EP2.6.13

孢子检测类别：

需氧孢子计数：孢子形成单位（SFU/g），参照USP<55>

厌氧孢子计数：孢子形成单位（SFU/g），参照ISO7937

耐热孢子检测：存活率（%），参照GB4789.3

真菌鉴定类别：

霉菌鉴定：属种级别鉴定（参照ISO21527）

酵母鉴定：属种级别鉴定（参照EP2.6.12）

丝状真菌检测：菌落形态分析（参照GB4789.15）

生物负载测试类别：

总活菌计数：微生物复苏率（%），参照ISO11737

灭菌验证测试：存活概率（SAL≤10⁻⁶），参照AAMIST79

内毒素检测：内毒素单位（EU/ml），参照USP<85>

抗生素敏感性类别：

最小抑菌浓度测定：MIC值（μg/ml），参照CLSIM07

抑菌圈直径测定：直径范围（mm），参照EUCAST

耐药性检测：耐药基因表达（阳性/阴性），参照ISO20776

环境监测类别：

空气沉降菌检测：菌落数（CFU/m³），参照ISO14698

表面擦拭菌检测：菌落数（CFU/cm²），参照GB15982

水质异养菌计数：菌落形成单位（CFU/100ml），参照ISO6222

病毒检测类别：

总病毒计数：病毒颗粒数（copies/ml），参照EP2.6.16

噬菌体检测：噬菌斑形成单位（PFU/ml），参照USP<1235>

病毒灭活验证：灭活率（log₁₀reduction），参照ICHQ5A

保存效力类别：

抗菌剂挑战测试：微生物减少率（log₁₀），参照ISO11930

防腐效能测试：存活时间（天），参照EP5.1.3

保质期验证：微生物稳定性（CFU变化），参照GB4789.1

污染物鉴定类别：

生物膜检测：生物膜厚度（μm），参照ASTME2647

交叉污染验证：微生物转移率（%），参照ISO14698

残留微生物检测：残留量（CFU/g），参照FDAGuidance

检测范围

1.药品制剂：涵盖注射剂、片剂和胶囊，重点检测无菌保证及总需氧菌计数，确保符合药典无菌要求

2.食品产品：包括乳制品、肉类和罐头，核心检测总微生物负荷和病原体，防止食源性污染

3.化妆品：涉及乳液、口红和洗发水，侧重防腐效能测试和霉菌酵母计数，评估产品安全性

4.医疗器械：如手术器械和植入物，重点检测生物负载和内毒素，验证灭菌效果

5.包装材料：塑料包装和玻璃容器，核心评估微生物屏障性能和表面擦拭菌，确保密封性

6.环境样品：空气和水质样本，侧重空气沉降菌和总大肠菌群，监控清洁度

7.原材料：药用辅料和食品添加剂，重点检测初始微生物负荷和孢子计数，控制原料质量

8.生物制品：疫苗和血清产品，核心检测病毒污染和抗生素敏感性，保障生物安全性

9.纺织品：医用织物和防护服，侧重抗菌性能和真菌鉴定，评估耐用性

10.个人护理用品：湿巾和消毒剂，重点检测保存效力和总活菌计数，验证抗菌效能

检测方法

国际标准：

USP<61>微生物计数试验

ISO11737-1灭菌医疗器材微生物方法

EP2.6.12真菌检测

ISO6579沙门氏菌检测

ISO21527酵母和霉菌计数

国家标准：

GB4789.2食品微生物学检验总则

GB15982医院消毒卫生标准

中国药典通则1105非无菌产品微生物检测

GB4789.3大肠菌群检测

GB4789.15霉菌和酵母计数

差异说明：国际标准如ISO11737强调膜过滤法优化，而GB标准采用平皿计数；USP培养温度为30-35°C，GB标准为35-37°C；EP病原体鉴定需生化验证，中国药典侧重PCR快速检测

检测设备

1.恒温培养箱：ThermoScientificHeratherm（温度范围20-60°C，精度±0.5°C）

2.生物安全柜：NuAireClassII（风速0.45m/s，HEPA过滤效率99.99%）

3.显微镜：OlympusCX43（放大倍数40-1000x，分辨率0.2μm）

4.PCR仪：AppliedBiosystems7500（检测限5copies/μl，温控精度±0.1°C）

5.菌落计数器：Scan®1200（自动计数精度99%，图像分辨率5MP）

6.自动微生物鉴定系统：VITEK2Compact（鉴定速度4-18小时，数据库覆盖300+菌种）

7.离心机：Eppendorf5430R（转速300-15000rpm，最大容量4×100ml）

8.纯水系统：Milli-Q（电阻率18.2MΩ·cm，流量1L/min）

9.恒温摇床：NewBrunswickInnova42（振荡速度25-300rpm，温度范围4-70°C）

10.高压灭菌器：Tuttnauer3870EA（灭菌温度121-134°C，舱体容量150L）

11.膜过滤装置：MilliporeStericup（过滤孔径0.22μm，流速100ml/min）

12.分光光度计：ThermoNanoDrop（波长范围190-840nm，样品量1-2μl）

13.恒温水浴锅：MemmertWNB14（温度精度±0.1°C，容量14L）

14.厌氧培养系统：BakerRuskinn（氧浓度≤0.1%，温度控制35°C）

15.荧光显微镜：LeicaDMi8（激发波长400-700nm，相机分辨率20MP