胃蛋白酶检测

检测项目

1. 酶活性测定：以酪蛋白为底物，测定单位时间内产物生成量（U/mg），活性范围需≥2500 U/mg。

2. pH稳定性测试：在pH 3.0-5.0范围内孵育1小时，残留活性应≥90%。

3. 热稳定性评估：37℃条件下处理30分钟，半衰期≥2小时。

4. 比活力分析：通过紫外分光光度法测定A280nm值，比活力≥3500 U/mg。

5. 杂质含量检测：采用HPLC法测定非蛋白酶杂质总量≤2%。

检测范围

1. 医药制剂：消化类药品中的胃蛋白酶原料药及成品。

2. 食品添加剂：肉类嫩化剂、发酵制品中的酶制剂。

3. 生物制品：细胞培养用消化酶及重组胃蛋白酶产品。

4. 诊断试剂：幽门螺杆菌检测试剂盒中的关键组分。

5. 工业酶制剂：皮革加工、饲料添加剂等领域的粗酶制剂。

检测方法

1. ASTM E2694-09：紫外分光光度法测定蛋白酶活性。

2. ISO 13301:2018：高效液相色谱法（HPLC）评估酶纯度。

3. GB/T 23535-2009：福林酚法测定蛋白质含量及比活力。

4. GB 5009.224-2016：微生物限度检测法控制生物负载。

5. USP-NF〈1058〉及ChP 2020四部：加速稳定性试验方法。

检测设备

1. UV-1800紫外可见分光光度计（岛津）：波长范围190-1100nm，精度±0.3nm。

2. Agilent 1260高效液相色谱仪：配备ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6×250mm）。

3. METTLER TOLEDO FE28 pH计：测量精度±0.01pH，温度补偿范围0-100℃。

4. THZ-98A恒温振荡器：控温精度±0.5℃，转速范围50-300rpm。

5. Eppendorf 5430R高速离心机：最大转速30,000rpm，配备角转子FA-45-30-11。

6. Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra电泳系统：支持SDS-PAGE及Western Blot分析。

7. Thermo Scientific Multiskan GO酶标仪：波长范围340-850nm，支持96/384孔板。

8. Sartorius CPA225D微量天平：称量范围0.01mg-220g，重复性≤0.03mg。

9. Christ Alpha 1-2 LDplus冷冻干燥机：冷阱温度-84℃，真空度≤0.01mbar。

10. Memmert WNB14恒温水浴锅：控温范围RT+5℃-99℃，波动度±0.1℃。